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全波長酶標儀的工作原理
更新時間:2023-05-18   點擊次數(shù):683次

(Microplate Reader)是對酶聯(lián)免疫檢測(EIA)實驗結(jié)果進行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。實際上就是一臺變相的專用光電比色計或,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。

一、原理

     使或結(jié)合到某種固相表面,并保持其活性。使或與某種連接成酶標抗原或,這種酶標抗原或抗體既保留其活性,又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相上形成的抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的后,底物被變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的。
            

二、酶標儀的應(yīng)用
     酶標儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗、生物學研究、農(nóng)業(yè)科學、食品和環(huán)境科學中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用,使得酶標儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛,同時促進了生殖健康技術(shù)水平提高。目前在國內(nèi)血站臨床試驗室中酶標儀成為ELISA測定的重要工具。在農(nóng)業(yè)中利用酶標儀研究酚氧化酶,為開發(fā)以該酶為靶標的新型害蟲控制劑提供理論依據(jù)。伏馬菌素是最近發(fā)現(xiàn)的一族主要由幾種真菌產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)相關(guān)的毒素代謝產(chǎn)物,該毒素已被世界衛(wèi)生組織列為近年來首*行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測伏馬菌素便顯得尤為重要。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標儀對微孔板進行光學測量,可以檢測伏馬菌素的含量,在食品安全方面有著重要的應(yīng)用。生長曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI?;蛘呔淇倲?shù)的對數(shù)log CFU/ml。隨時間變化曲線,可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規(guī)律。目前通過分光光度計測定菌懸液時存在即時性差、操作繁瑣、易污染等缺點,由于酶標儀是一種快速、準確、高通量的儀器,所以我們總會選擇使用酶標儀來進行菌懸液OD值的測定,來提高工作效率,節(jié)約時間。

      Thermofisher新推出的全波長讀數(shù)儀Multiskan GO支持終點法、動力學和光譜掃描測量,采用氙燈作為光源,通過*的光柵系統(tǒng)進行波長選擇,波長范圍從200nm到1000nm,可以1nm步進量進行全光譜掃描,包括紫外和近紅外,可以自由選擇任何波長。其具備微孔板和比色杯測量的雙重功能,既可作為全波長酶標儀,也可作為全波長分光光度計使用。


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